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探讨高氧暴露对原代培养的胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)、成纤维细胞(LFs)增殖和凋亡的影响以及维甲酸(RA)的保护作用机制.通过建立高氧暴露原代培养的胎鼠AECⅡ和LFs模型,以RA作为干预方式,采用流式细胞术(膜联蛋白V-PI双标记)检测AECⅡ和LFs凋亡,Western印迹检测AECⅡ增殖细胞核抗原(PCNA)、p53及caspase-3表达和LFs PCNA表达.结果发现:(1)与空气对照比较,高氧暴露12 h,膜联蛋白v(+)PI(-)和膜联蛋白V(+)PI(+)标记AECⅡ数均显著升高(14.41±1.15 vs 2.80±0.19,P<0.01;61.07±3.06 vs 1.49±0.11,P<0.01);RA对空气暴露下AECⅡ坏死、凋亡无明显影响,但明显下调高氧暴露下膜联蛋白V(+)PI(-)和膜联蛋白V(+)PI(+)标记AECⅡ数(8.04±0.79 vs 14.41±1.15,P<0.01;27.57±2.32 vs 61.07±3.06,P<0.01).(2)高氧、RA对LFs坏死、凋亡无明显影响.(3)高氧暴露12 h,明显降低AECⅡ PCNA表达(P<0.01),显著提高其p53(P<0.01)和caspase-3活性片段(P<0.01)表达;RA显著上调高氧暴露下AECⅡ PCNA表达(P<0.01),下调其p53和caspase-3活化片段表达(P<0.01).(4)高氧、RA对LFs PCNA表达无明显影响.由此提示,高氧暴露,导致AECⅡ大量凋亡、坏死,增殖受到抑制,同时,LFs所受影响较小,两种细胞对高氧暴露的差异性行为可能是导

作者:李文斌;常立文;容志惠;王华;卢红艳;汪鸿;刘伟

来源:细胞生物学杂志 2007 年 29卷 1期

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作者:
李文斌;常立文;容志惠;王华;卢红艳;汪鸿;刘伟
来源:
细胞生物学杂志 2007 年 29卷 1期
标签:
高氧 维甲酸 肺泡Ⅱ型上皮细胞 肺成纤维细胞 凋亡 增殖
探讨高氧暴露对原代培养的胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)、成纤维细胞(LFs)增殖和凋亡的影响以及维甲酸(RA)的保护作用机制.通过建立高氧暴露原代培养的胎鼠AECⅡ和LFs模型,以RA作为干预方式,采用流式细胞术(膜联蛋白V-PI双标记)检测AECⅡ和LFs凋亡,Western印迹检测AECⅡ增殖细胞核抗原(PCNA)、p53及caspase-3表达和LFs PCNA表达.结果发现:(1)与空气对照比较,高氧暴露12 h,膜联蛋白v(+)PI(-)和膜联蛋白V(+)PI(+)标记AECⅡ数均显著升高(14.41±1.15 vs 2.80±0.19,P<0.01;61.07±3.06 vs 1.49±0.11,P<0.01);RA对空气暴露下AECⅡ坏死、凋亡无明显影响,但明显下调高氧暴露下膜联蛋白V(+)PI(-)和膜联蛋白V(+)PI(+)标记AECⅡ数(8.04±0.79 vs 14.41±1.15,P<0.01;27.57±2.32 vs 61.07±3.06,P<0.01).(2)高氧、RA对LFs坏死、凋亡无明显影响.(3)高氧暴露12 h,明显降低AECⅡ PCNA表达(P<0.01),显著提高其p53(P<0.01)和caspase-3活性片段(P<0.01)表达;RA显著上调高氧暴露下AECⅡ PCNA表达(P<0.01),下调其p53和caspase-3活化片段表达(P<0.01).(4)高氧、RA对LFs PCNA表达无明显影响.由此提示,高氧暴露,导致AECⅡ大量凋亡、坏死,增殖受到抑制,同时,LFs所受影响较小,两种细胞对高氧暴露的差异性行为可能是导