目的: 构建携带人Trx(硫氧还蛋白)基因的逆转录病毒载体.方法: 用DNA重组技术, 将人Trx基因定向克隆入逆转录病毒载体pLXSN, 用限制性内切酶EcoRⅠ和BamHⅠ进行酶切鉴定.以磷酸钙转染法, 将重组的逆转录病毒载体转染入包装细胞系PA317, 并用G418筛选的方法测定转染细胞上清中病毒的滴度.结果: 构建了重组逆转录病毒载体, 经EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切, 电泳出现两个条带, 分别为0.3 kb和5.9 kb.转染细胞上清中病毒滴度为5.5×109 cfu/L.提示构建携带人Trx基因的逆转录载体成功.结论: 携带人Trx基因的逆转录病毒载体成功构建为Trx基因的治疗、实验研究奠定了基础.
作者：李敏杰；刘勇；赵建军；王全颖；杨广笑
来源：细胞与分子免疫学杂志 2003 年 19卷 3期
