目的:探讨采用腺病毒做为载体介导基于RNA干涉的针对高HER2肿瘤的基因治疗的可能性.方法:构建HER2-绿色荧光蛋白融合蛋白表达质粒pHER2-GFP,并与9种针对HER2不同靶序列的siRNA表达质粒分别共转染CHO-K1细胞, 根据荧光蛋白表达量从中筛选出沉默效率最高的质粒.将筛选出的质粒转染HER2高表达乳腺癌SKBR3细胞,检测它们对HER2表达的影响.随后, 将siRNA转录单元克隆入腺病毒载体, 成功包装病毒后感染SKBR3细胞, 再次测定其下调HER2的效应及其对细胞生长的影响.结果:2种有效下调HER2表达的质粒被筛选出来.将此2种质粒所含siRNA转录单元包装入腺病毒后仍然保持了原有的基因沉默效应.HER2下调增加了SKBR3细胞中G1期细胞的比例,并且诱导部分细胞凋亡.MTT和细胞长期增殖抑制实验表明腺病毒介导的RNA干涉抑制了SKBR3细胞生长.结论:重组腺病毒介导的RNA干涉能够下调HER2的表达并且对高表达HER2的乳腺癌细胞有生长抑制作用.
作者：程联胜；查昭；席甲甲；江冰；刘兢；姚雪彪
来源：细胞与分子免疫学杂志 2007 年 23卷 8期
