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目的:建立人NK细胞体外大量扩增的方法.方法:采用基因工程方法,在K562细胞上同时表达IL-15、 IL-18、 4-1BBL 3种基因,构建特定的K562工程细胞作为刺激细胞.IL-15、 IL-18基因分别与一段特殊的跨膜蛋白基因融合,4-1BBL直接跨膜表达,使这3种蛋白在K562细胞中表达后锚定于细胞膜表面.其次,以照射致死的该K562工程细胞作为刺激细胞,以人外周血单个核细胞(PBMC)为扩增培养对象,通过与IL-2的共刺激作用,使NK细胞在体外培养条件下得到大量的扩增.结果:经过21 d的刺激培养后,CD56+CD3-细胞数量扩增了(520±75)倍.CD56+CD3-细胞的纯度从培养前占PBMC的7

作者:黄庆生;李琦;黄勇;商澎;张明杰

来源:细胞与分子免疫学杂志 2008 年 24卷 12期

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作者:
黄庆生;李琦;黄勇;商澎;张明杰
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2008 年 24卷 12期
标签:
扩增 自然杀伤细胞 白细胞介素15 白细胞介素18 4-1BB配体
目的:建立人NK细胞体外大量扩增的方法.方法:采用基因工程方法,在K562细胞上同时表达IL-15、 IL-18、 4-1BBL 3种基因,构建特定的K562工程细胞作为刺激细胞.IL-15、 IL-18基因分别与一段特殊的跨膜蛋白基因融合,4-1BBL直接跨膜表达,使这3种蛋白在K562细胞中表达后锚定于细胞膜表面.其次,以照射致死的该K562工程细胞作为刺激细胞,以人外周血单个核细胞(PBMC)为扩增培养对象,通过与IL-2的共刺激作用,使NK细胞在体外培养条件下得到大量的扩增.结果:经过21 d的刺激培养后,CD56+CD3-细胞数量扩增了(520±75)倍.CD56+CD3-细胞的纯度从培养前占PBMC的7