目的:制备可同时识别血红蛋白A2(HbA2)与血红蛋白A(HbA)的单克隆抗体(mAb),即与血红蛋白的δ链与β链结合,而不与γ链结合.方法:以原核表达的重组Hbδ链免疫小鼠,常规融合制备杂交瘤细胞,以离子交换层析分离的天然HbA2与HbA为抗原同时进行筛选;所获mAb用间接ELISA、基于变性与非变性聚丙烯凝胶电泳的Western blot、等离子表面共振及流式细胞术进行鉴定.结果:所获mAb 2C9以高亲和力与纯化的天然HbA2与HbA结合,经等离子表面共振测定KA值分别为2.25×1011、2.16×1010;该mAb不与胎儿血红蛋白(HbF)、血红蛋白α链及重组血红蛋白ζ(zeta)链结合.结论:获得1株可结合HbA2与HbA的mAb2C9,提示其识别血红蛋白δ链与β链的共同表位.该抗体将成为研究与诊断血红蛋白病的有效工具.
作者:朱平;肖海燕;陈益国;徐梅;富宁
来源:细胞与分子免疫学杂志 2010 年 26卷 6期