目的 检测LNCaP细胞内miR-141-3p对雄激素受体(AR)基因靶向调控作用,明确AR是否为miR-141-3p的靶基因.方法 将miR-141-3p mimics转染LNCaP细胞后,利用反转录PCR和Western blot法分别检测LNCaP细胞中AR的mRNA和蛋白表达.采用PCR方法扩增得到含有miR-141-3p结合位点的AR mRNA 3'非翻译区(3'UTR)片段,并插入到pmiR-report载体萤光素酶基因的3'下游区,并将所构建载体命名为pmiR-AR-3' UTR;萤光素酶报告基因检测试剂盒检测miR-141-3p对pmiR-AR-3'UTR靶向抑制效果.结果 转染miR-141-3p mimics可降低LNCaP细胞内源AR的mRNA和蛋白水平;萤光素酶活性检测结果显示:与对照组相比,miR-141-3p可明显抑制pmiR-AR-3'UTR萤光素酶活性.结论 AR是miR-141-3p的靶基因.
作者：王琛；欧阳永日；路蔓；卫军霞；张惠中
来源：细胞与分子免疫学杂志 2015 年 31卷 6期
