目的 制备抗Ras相关C3肉毒毒素底物1(Rac1)兔多克隆抗体并进行初步应用.方法 以人宫颈癌细胞系HeLa细胞cDNA为模板,构建重组表达质粒pET-32a-Rac1.His-Rac1融合蛋白在大肠杆菌中成功表达,将纯化后的融合蛋白作为免疫原免疫家兔制备兔多克隆抗体.分别采用ELISA、Western blot法和免疫组织化学技术对抗Rac1抗血清的效价及特异性进行鉴定.结果 His-Rac1融合蛋白成功构建并高效表达.制备的抗Rac1兔多克隆抗体可以检测到HeLa细胞、MCF-7细胞的Rac1蛋白,并能识别人肾组织中的Rac1蛋白.结论 成功制备了兔抗人Rac1多克隆抗体,该抗体可以识别多种天然样本中的Rac1蛋白.
作者:张莉莉;郝露;左威;马维佳;刘莹
来源:细胞与分子免疫学杂志 2015 年 31卷 8期