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目的 观察NADPH氧化酶抑制剂二苯基碘(DPI)和夹竹桃麻素(apocynin)对NADPH氧化酶亚基p47phox介导的活性氧(ROS)产生的影响,探讨细胞在高氧条件下,p47phox介导ROS产生的机制.方法 32周以下早产儿,尚未吸氧前取外周血2mL,分离纯化外周血单个核细胞(PBMC)将所得细胞分为对照组、高氧组、高氧联合DPI处理组、高氧联合apocynin处理组进行培养.对照组置于37℃、50 mL/L的CO2培养箱中,高氧及相应处理组置于950 mL/L的O2与50 mL/L的CO2混合气体中培养48 h.采用Mitosox Red标记结合激光共聚焦显微镜检测PBMC内ROS的生成量、硫代巴比妥酸比色法检测培养液丙二醛含量、免疫荧光检测p47phox在细胞内的定位及移位率、Western blot法检测P47phox的蛋白水平.结果 与高氧组相比,其余三组ROS和丙二醛明显减少,p47phox移位率与含量也显著降低;与对照组相比,高氧联合DPI处理组及高氧联合apocynin处理组ROS、丙二醛、p47phox移位率与含量并无显著差异.结论 DPI和apocynin能通过降低p7phox移位与含量来减少高氧诱导的ROS升高.

作者:张玲萍;董文斌;李清平;康兰;张莲玉;卢佑英;翟雪松

来源:细胞与分子免疫学杂志 2016 年 32卷 1期

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作者:
张玲萍;董文斌;李清平;康兰;张莲玉;卢佑英;翟雪松
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2016 年 32卷 1期
标签:
高氧暴露 二苯基碘 罗布麻宁 p47phox hyperoxia exposure diphenylene iodonium apocynin p47phox
目的 观察NADPH氧化酶抑制剂二苯基碘(DPI)和夹竹桃麻素(apocynin)对NADPH氧化酶亚基p47phox介导的活性氧(ROS)产生的影响,探讨细胞在高氧条件下,p47phox介导ROS产生的机制.方法 32周以下早产儿,尚未吸氧前取外周血2mL,分离纯化外周血单个核细胞(PBMC)将所得细胞分为对照组、高氧组、高氧联合DPI处理组、高氧联合apocynin处理组进行培养.对照组置于37℃、50 mL/L的CO2培养箱中,高氧及相应处理组置于950 mL/L的O2与50 mL/L的CO2混合气体中培养48 h.采用Mitosox Red标记结合激光共聚焦显微镜检测PBMC内ROS的生成量、硫代巴比妥酸比色法检测培养液丙二醛含量、免疫荧光检测p47phox在细胞内的定位及移位率、Western blot法检测P47phox的蛋白水平.结果 与高氧组相比,其余三组ROS和丙二醛明显减少,p47phox移位率与含量也显著降低;与对照组相比,高氧联合DPI处理组及高氧联合apocynin处理组ROS、丙二醛、p47phox移位率与含量并无显著差异.结论 DPI和apocynin能通过降低p7phox移位与含量来减少高氧诱导的ROS升高.