目的 构建含有白细胞介素8(IL-8)基因的重组腺病毒,并观察其对BT549乳腺癌细胞增殖、细胞周期以及迁移能力的影响.方法 以143B细胞cDNA为模版,PCR扩增IL-8基因,与穿梭质粒pAdTrack-TO4连接,构建重组穿梭质粒pAdTrack-TO4-IL-8,由PmeⅠ线性化并电转入AdEasier细菌中,获得重组腺病毒质粒pAdIL-8,PacI酶切经LipofectamineTM 2000介导转入HEK293细胞进行包装扩增,检测滴度;反转录PCR检测BT549细胞中IL-8 mRNA的水平,ELISA检测BT549细胞培养上清液中IL-8的水平;流式细胞术检测细胞周期情况;MTT法检测细胞增殖能力;划痕愈合实验检测细胞迁移能力.结果 PCR以及测序证实pAdTrack-TO4-IL-8构建成功;pAdIL-8经酶切证实重组正确;重组腺病毒AdIL-8感染BT549细胞,可高表达IL-8.过表达IL-8的BT549细胞迁移能力增强,但其增殖活性无明显变化、将细胞周期阻滞于S期.结论 过表达IL-8可促进BT549细胞的迁移.
作者：邓芳；王静；范梦恬；郭杨柳；李亚；施琼
来源：细胞与分子免疫学杂志 2016 年 32卷 5期
