目的:观察自噬调控基因beclin 1过表达对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC) BT-549细胞的体外生长影响.方法:应用荧光显微镜观察细胞转染效率,采用qRT-PCR和蛋白质印迹法检测细胞beclin 1 mRNA和蛋白表达水平,采用吖啶橙染色观察细胞自噬情况,采用MTT检测细胞的增殖率,采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期情况.结果:细胞转染48 h实验组和对照组的细胞转染效率均＞45％,qRT-PCR提示实验组细胞beclin 1 mR-NA 2-ΔΔCt值为16.806±2.920,较空白组(0.853±0.025)显著升高,F=88.733,P＜0.001;蛋白质印迹法提示实验组细胞beclin 1/GAPDH灰度值比为1.050±0.056,较空白组(0.640±0.006)显著升高,F=137.213,P＜0.001;吖啶橙染色提示实验组细胞发生自噬的比例为33％,显著高于空白组(15％),x2=8.985,P=0.011;MTT法提示实验组细胞增殖率在24 h(0.152±0.019)、48 h(0.254±0.029)、72 h(0.322±0.027)和96 h(0.357±0.035)均显著低于空白组24 h(0.202±0.023)、48 h(0.308±0.030)、72 h(0.446±0.032)和96 h(0.851±0.014),P值均＜0.05;72 h实验组细胞凋亡率为(6.560±0.593)％,显著高于空白组(2.533±0.216)％,F=107.085,P＜0.001;实验组G0/G1期为(63.267±3.650)％,显著高于空白组(51.533±5.

作者：吴爱国；王梦川；王日玮；原红军；纪术峰；邵国利；郑临海；范旭龙；焦庆丽

来源：中华肿瘤防治杂志 2014 年 21卷 15期