目的 自噬是细胞内的一种溶酶体降解过程,通过降解损伤的蛋白以及衰老的细胞器来维持细胞稳态,也是肿瘤治疗耐药性产生的原因之一.本实验探讨自噬抑制剂联合吉非替尼(gefitinib,GE)对人三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC) MDA-MB-468细胞敏感性的影响.方法 常规复苏、传代培养MDA-MB-468细胞,待细胞处于对数生长期后分别以GE单药或联合自噬抑制剂3-methyladenine(3MA)或联合bafilomycin A1 (BAF)处理细胞.MTT比色法检测细胞相对增殖率,克隆形成实验检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白的表达.结果 自噬抑制剂明显增加GE的细胞毒性,MTT比色法检测GE联合3MA、BAF处理MDA-MB-468细胞48 h后半抑制率(IC50)分别为(4.1±0.2)和(3.8±0.3)μmol/L,显著低于单用GE组的(7.0±0.2) μmol/L,Z=-2.611,P＜0.017.克隆形成实验显示,GE与自噬抑制剂联合3MA、BAF克隆形成率分别为(29.85±5.54)％和(33.58±6.31)％,显著低于单用GE组(63.46±8.32)％,Z=-2.309,P＜0.017.细胞凋亡的研究显示,自噬抑制可促进细胞凋亡,GE联合3MA、BAF后,凋亡率分别为(23.37士2.71)％、(18.71±2.81)％,高于单用GE组(12.43±3.18)％,Z=-2.309,P＜0.017.蛋白质印迹法检测结果显示,GE处理诱导自

作者：刘兆芸；李景；贺科文；马清华；卓培英；朱文尧；王新昭；于志勇

来源：中华肿瘤防治杂志 2016 年 23卷 15期