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目的 探讨过表达Klotho (KL)对可溶性核因子κB受体激活蛋白配体(sRANKL)诱导小鼠RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响.方法 实验分为过表达KL组(Ad-KL组)、空载体组(Ad-GFP组)与空白对照组.倒置荧光显微镜观察重组腺病毒转染RAW264.7细胞情况,实时荧光定量(qRT-PCR)和Western blot法检测KL的mRNA或蛋白水平;抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测过表达KL对sRANKL诱导RAW264.7细胞向破骨细胞分化的形态学影响;qRT-PCR和Western blot法检测各组破骨细胞成熟标志物TRAP、组织蛋白酶K(CTSK)的mRNA或蛋白水平.结果 与Ad-GFP组和空白对照组比较,Ad-KL组细胞KL mRNA和蛋白水平显著升高;TRAP染色显示,Ad-KL组TRAP阳性细胞数量显少于Ad-GFP组和空白对照组,体积也更小;与Ad-GFP组和空白对照组比较,Ad-KL组TRAP和CTSK mRNA和蛋白水平也明显降低.结论 过表达KL抑制RAW264.7细胞向破骨细胞分化.

作者:徐锋;马厚勋;李宝善;肖碧;黄倩;梁霄

来源:细胞与分子免疫学杂志 2017 年 33卷 6期

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作者:
徐锋;马厚勋;李宝善;肖碧;黄倩;梁霄
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2017 年 33卷 6期
标签:
Klotho 破骨细胞 RAW264.7细胞 抗酒石酸酸性磷酸酶 Klotho osteoclast RAW264.7 cells tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP)
目的 探讨过表达Klotho (KL)对可溶性核因子κB受体激活蛋白配体(sRANKL)诱导小鼠RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响.方法 实验分为过表达KL组(Ad-KL组)、空载体组(Ad-GFP组)与空白对照组.倒置荧光显微镜观察重组腺病毒转染RAW264.7细胞情况,实时荧光定量(qRT-PCR)和Western blot法检测KL的mRNA或蛋白水平;抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测过表达KL对sRANKL诱导RAW264.7细胞向破骨细胞分化的形态学影响;qRT-PCR和Western blot法检测各组破骨细胞成熟标志物TRAP、组织蛋白酶K(CTSK)的mRNA或蛋白水平.结果 与Ad-GFP组和空白对照组比较,Ad-KL组细胞KL mRNA和蛋白水平显著升高;TRAP染色显示,Ad-KL组TRAP阳性细胞数量显少于Ad-GFP组和空白对照组,体积也更小;与Ad-GFP组和空白对照组比较,Ad-KL组TRAP和CTSK mRNA和蛋白水平也明显降低.结论 过表达KL抑制RAW264.7细胞向破骨细胞分化.