目的 鉴定结核分枝杆菌早期分泌靶向抗原6 (ESAT-6)样蛋白esxN特异性HLA-A* 0201限制性细胞毒性T细胞(CTL)表位并用于肺结核诊断.方法 采用SYFPEITHI软件预测esxN中受HLA-A* 0201限制性的CTL表位并合成候选表位;采用主要组织相容性复合体(MHC)-肽复合物稳定性实验检测候选表位与HLA-A* 0201分子结合力;采用酶联免疫斑点实验(ELISPOT)研究候选表位在HLA-A*0201转基因小鼠中的免疫原性;基于鉴定的CTL表位、ESAT-6和培养滤液蛋白10(CFP-10),采用ELISPOT检测肺结核患者体内表位及蛋白特异性CTL的水平.结果 6条候选CTL表位中,esxN15-24(AMIRAQAASL)和esxN48-57 (VACQEFITQL)与HLA-A* 0201分子有较高结合力;候选表位免疫HLA-A* 0201转基因小鼠,esxN48-57诱导产生可分泌γ干扰素(IFN-γ)的T细胞反应;在HLA-A* 0201阳性肺结核患者中检测到esxN15-24、esxN48-57、ESAT-6、CFP-10特异性分泌IFN-γ的T细胞;esxN15-24、esxN48-57诊断肺结核的敏感率与ESAT-6、CFP-10相近.结论 从结核分枝杆菌esxN中鉴定出两条HLA-A*0201限制性CTL表位,其有望用于辅助肺结核病的诊断.
作者：徐志刚；李德周；陈新宇；段志良；毛嘉媛；文金生
来源：细胞与分子免疫学杂志 2017 年 33卷 12期
