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目的 探讨miR-100-5p在非创伤性股骨头坏死(NONFH)发病机制中的作用.方法 实时定量PCR检测NONFH患者的miRNA表达,确定NONFH患者股骨头组织miR-100-5p高表达.而后培养大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSC)分为空白对照组,地塞米松处理组(地塞米松处理3 d),微小RNA阴性对照组(转染miR-NC),agomiR-100-5p组(miR-100-5p过表达),antagomiR-100-5p组(转染miR-100-5p拮抗剂).使用实时定量PCR检测股骨头骨组织miR-100-5p、碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2(RUNX2)和Ⅰ型胶原蛋白(Col1)的mRNA表达.采用Western blot法检测股骨头骨组织ALP、RUNX2、Col1和骨形态发生蛋白受体2(BMPR2)蛋白的表达.采用划痕愈合实验评估miR-100-5p对rBMSC迁移能力的影响.通过茜素红染色观察miR-100-5p对rBMSC成骨分化能力的影响.结果 与正常的股骨头骨组织相比,NONFH患者股骨头骨组织中miR-100-5p显著上调;与正常rBMSC相比,20 μmol/L地塞米松处理后的rBMSC中miR-100-5p表达上调;rBMSC中miR-100-5p的上调降低ALP、RUNX2、Col1和BMPR2的表达,抑制rBMSC的成骨分化能力和迁移能力.结论 miR-100-5p在NONFH患者的骨组织和20 μmol/L地塞米松处理后的rBMSC中表达升高.上调的miR-100-5p可能通过抑制rBMSC的迁移和成骨分化参与NONFH的发病机制.

作者:杨武;杨韵霏;郭民康;朱卫文;赵安平;白浩波;张健

来源:细胞与分子免疫学杂志 2022 年 38卷 2期

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作者:
杨武;杨韵霏;郭民康;朱卫文;赵安平;白浩波;张健
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2022 年 38卷 2期
标签:
大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSC) 非创伤性股骨头坏死(NONFH) miR-100-5p 细胞迁移 成骨分化
目的 探讨miR-100-5p在非创伤性股骨头坏死(NONFH)发病机制中的作用.方法 实时定量PCR检测NONFH患者的miRNA表达,确定NONFH患者股骨头组织miR-100-5p高表达.而后培养大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSC)分为空白对照组,地塞米松处理组(地塞米松处理3 d),微小RNA阴性对照组(转染miR-NC),agomiR-100-5p组(miR-100-5p过表达),antagomiR-100-5p组(转染miR-100-5p拮抗剂).使用实时定量PCR检测股骨头骨组织miR-100-5p、碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2(RUNX2)和Ⅰ型胶原蛋白(Col1)的mRNA表达.采用Western blot法检测股骨头骨组织ALP、RUNX2、Col1和骨形态发生蛋白受体2(BMPR2)蛋白的表达.采用划痕愈合实验评估miR-100-5p对rBMSC迁移能力的影响.通过茜素红染色观察miR-100-5p对rBMSC成骨分化能力的影响.结果 与正常的股骨头骨组织相比,NONFH患者股骨头骨组织中miR-100-5p显著上调;与正常rBMSC相比,20 μmol/L地塞米松处理后的rBMSC中miR-100-5p表达上调;rBMSC中miR-100-5p的上调降低ALP、RUNX2、Col1和BMPR2的表达,抑制rBMSC的成骨分化能力和迁移能力.结论 miR-100-5p在NONFH患者的骨组织和20 μmol/L地塞米松处理后的rBMSC中表达升高.上调的miR-100-5p可能通过抑制rBMSC的迁移和成骨分化参与NONFH的发病机制.