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目的 观察高糖和甘露聚糖结合凝集素(MBL)对体外培养的人肾小球内皮细胞(HRGEC)表达白细胞介素-18(Ⅱ-18)的影响.方法 体外培养正常HRGEC,按干预条件随机分为对照组(5mmol/L D-葡萄糖)、高糖组(30mmol/L D葡萄糖)和甘露醇组(5mmol/L D-葡萄糖+25mmol/L甘露醇),培养72小时后分别采用实时荧光定量RCR法(Real - time PCR)和ELISA法检测各组细胞IL-18的mRNA及细胞培养上清波中的蛋白表达.另取细胞随机分为单纯高糖组和高糖+ MBL组,均用高糖培养72h后,分别加入等量的30% MBL缺乏人血清,高糖+MBL组另加10μg/ml MBL,继续培养4h.采用免疫荧光法检测各组细胞表面凝集素补体途径(LCP)激活终产物膜攻击复合物(MAC)的沉积,并检测各组细胞IL-18的mRNA和蛋白表达.结果 与其他各组相比,高糖组细胞的IL-18mRNA以及蛋白表达均明显增加(P<0.05);高糖+MBL组细胞表面有明显MAC沉积,IL-18 mRNA及蛋白表达与单纯高糖组相比明显增加(P<0.05).结论 高糖可以诱导人肾小球内皮细胞炎症因子过表达;高糖和MBL共存时可促成LCP激活,并对DN的炎症状态具有促进作用.

作者:武晓慧;宁晓霞;杨慧宇

来源:西部医学 2012 年 24卷 8期

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作者:
武晓慧;宁晓霞;杨慧宇
来源:
西部医学 2012 年 24卷 8期
标签:
甘露聚糖结合凝集素 高糖 糖尿病肾病 人肾小球内皮细胞 白细胞介素-18
目的 观察高糖和甘露聚糖结合凝集素(MBL)对体外培养的人肾小球内皮细胞(HRGEC)表达白细胞介素-18(Ⅱ-18)的影响.方法 体外培养正常HRGEC,按干预条件随机分为对照组(5mmol/L D-葡萄糖)、高糖组(30mmol/L D葡萄糖)和甘露醇组(5mmol/L D-葡萄糖+25mmol/L甘露醇),培养72小时后分别采用实时荧光定量RCR法(Real - time PCR)和ELISA法检测各组细胞IL-18的mRNA及细胞培养上清波中的蛋白表达.另取细胞随机分为单纯高糖组和高糖+ MBL组,均用高糖培养72h后,分别加入等量的30% MBL缺乏人血清,高糖+MBL组另加10μg/ml MBL,继续培养4h.采用免疫荧光法检测各组细胞表面凝集素补体途径(LCP)激活终产物膜攻击复合物(MAC)的沉积,并检测各组细胞IL-18的mRNA和蛋白表达.结果 与其他各组相比,高糖组细胞的IL-18mRNA以及蛋白表达均明显增加(P<0.05);高糖+MBL组细胞表面有明显MAC沉积,IL-18 mRNA及蛋白表达与单纯高糖组相比明显增加(P<0.05).结论 高糖可以诱导人肾小球内皮细胞炎症因子过表达;高糖和MBL共存时可促成LCP激活,并对DN的炎症状态具有促进作用.