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目的 采用高糖和甘露聚糖结合凝集素(MBL)共同培养人肾小球内皮细胞(HRGEC),探讨糖尿病肾病是否存在替代途径补体激活发病机制.方法 体外培养正常HRGEC,随机分为单纯高糖组和高糖+MBL组,两组分别用30mmol/L D-葡萄糖培养72h后,加入等量30% MBL缺乏人血清,高糖+MBL组另外加入10μg/mL MBL,继续培养4h.采用流式细胞技术观察细胞表面MBL-C-3bBb的沉积,采用免疫荧光染色观察补体激活产物膜攻击复合物(MAC)的沉积.结果 流式细胞技术证实,高糖+MBL组细胞表面有明显的MBL和C-3bBb共沉积,免疫荧光染色显示该组细胞表面有明显MAC沉积,单纯高糖组无上述现象.结论 高糖和MBL共同存在时发生MBL补体途径激活,并启动补体的替代途径,DN发病可能与上述两条补体途径激活有关.

作者:武晓慧;杨慧宇;唐蕊

来源:西部医学 2012 年 24卷 9期

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作者:
武晓慧;杨慧宇;唐蕊
来源:
西部医学 2012 年 24卷 9期
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人肾小球内皮细胞 高糖 甘露聚糖结合凝集素 替代途径 C-3bBb
目的 采用高糖和甘露聚糖结合凝集素(MBL)共同培养人肾小球内皮细胞(HRGEC),探讨糖尿病肾病是否存在替代途径补体激活发病机制.方法 体外培养正常HRGEC,随机分为单纯高糖组和高糖+MBL组,两组分别用30mmol/L D-葡萄糖培养72h后,加入等量30% MBL缺乏人血清,高糖+MBL组另外加入10μg/mL MBL,继续培养4h.采用流式细胞技术观察细胞表面MBL-C-3bBb的沉积,采用免疫荧光染色观察补体激活产物膜攻击复合物(MAC)的沉积.结果 流式细胞技术证实,高糖+MBL组细胞表面有明显的MBL和C-3bBb共沉积,免疫荧光染色显示该组细胞表面有明显MAC沉积,单纯高糖组无上述现象.结论 高糖和MBL共同存在时发生MBL补体途径激活,并启动补体的替代途径,DN发病可能与上述两条补体途径激活有关.