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目的 探讨miR-15b靶向溶血磷脂酸受体3(LPAR3)调控PI3K/AKT信号通路对子宫内膜癌细胞(HEC-1B)增殖的影响.方法 生物信息学分析预测并通过荧光素酶报告基因实验验证miR-15b与LPAR3之间的靶向结合作用;将HEC-1B细胞分为NC组、miR-15b mimic组、miR-15b inhibitor组、siRNA-LPAR3组和miR-15binhibitor+ siRNA-LPAR3组,实时荧光定量PCR和Western blot检测miR-15b、LPAR3和PI3K/AKT信号通路相关因子磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、苏氨酸激酶(AKT)在HEC-1B和人子宫内膜上皮细胞(HEEC)中的表达水平;噻唑蓝(MTT)法检测HEC-1B的细胞活力;流式细胞术检测HEC-1B的细胞周期分布;Transwell测定法检测HEC-1B的细胞迁移和侵袭能力.结果 LPAR3为miR-15b的靶基因;与HEEC组相比,HEC-1B组中LPAR3、PI3K和AKT mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),而miR-15b表达显著降低(P<0.05);与NC组相比,siRNA-LPAR3组细胞PI3K/AKT信号通路相关因子mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05),miR-15b mimic组细胞LPAR3和PI3K/AKT信号通路相关因子mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与NC组相比,siRNA-LPAR3组HEC-1B的细胞活力、S期细胞比例、迁移和侵袭能力均明显降低(P<0.05),miR-15bmimic组HEC-1B的细胞活力、S期细胞比例、迁移和侵袭能力

作者:毛莉;肖新益;段婧雅

来源:西部医学 2020 年 32卷 9期

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作者:
毛莉;肖新益;段婧雅
来源:
西部医学 2020 年 32卷 9期
标签:
miR-15b PI3K/AKT信号通路 子宫内膜癌 细胞增殖
目的 探讨miR-15b靶向溶血磷脂酸受体3(LPAR3)调控PI3K/AKT信号通路对子宫内膜癌细胞(HEC-1B)增殖的影响.方法 生物信息学分析预测并通过荧光素酶报告基因实验验证miR-15b与LPAR3之间的靶向结合作用;将HEC-1B细胞分为NC组、miR-15b mimic组、miR-15b inhibitor组、siRNA-LPAR3组和miR-15binhibitor+ siRNA-LPAR3组,实时荧光定量PCR和Western blot检测miR-15b、LPAR3和PI3K/AKT信号通路相关因子磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、苏氨酸激酶(AKT)在HEC-1B和人子宫内膜上皮细胞(HEEC)中的表达水平;噻唑蓝(MTT)法检测HEC-1B的细胞活力;流式细胞术检测HEC-1B的细胞周期分布;Transwell测定法检测HEC-1B的细胞迁移和侵袭能力.结果 LPAR3为miR-15b的靶基因;与HEEC组相比,HEC-1B组中LPAR3、PI3K和AKT mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),而miR-15b表达显著降低(P<0.05);与NC组相比,siRNA-LPAR3组细胞PI3K/AKT信号通路相关因子mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05),miR-15b mimic组细胞LPAR3和PI3K/AKT信号通路相关因子mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与NC组相比,siRNA-LPAR3组HEC-1B的细胞活力、S期细胞比例、迁移和侵袭能力均明显降低(P<0.05),miR-15bmimic组HEC-1B的细胞活力、S期细胞比例、迁移和侵袭能力