目的 探讨沉默真核翻译起始因子5A-2(eIF5A-2)对人肺癌细胞株A549/DDP耐药及自噬的影响.方法 体外培养人肺癌细胞株A549、A549/DDP,转染细胞A549/DDP,细胞分为eIF5A-2-SiRNA组、阴性对照组(NC组)及空白对照组,另以A549细胞为正常对照组.病毒感染72 h后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中eIF5A-2 mRNA表达水平,MTT法检测细胞DDP作用下A549/DDP细胞的耐药性,流式细胞术检测细胞的凋亡率,单酰戊二胺(MDC)染色检测细胞自噬水平,蛋白免疫印记(Western blot)法检测eIF5A-2、LC3 Ⅱ及Beclin-1蛋白相对表达水平.结果 与正常对照组相比,空白对照组、NC组A549/DDP细胞eIF5A-2 mRNA相对表达水平显著升高(均P<0.05);与空白对照组、NC组相比,eIF5A-2-SiRNA组细胞凋亡率显著升高,细胞IC50、自噬小体数目、eIF5A-2、LC3 Ⅱ及Beclin-1蛋白相对表达水平显著降低(均P<0.05).结论 eIF5A-2下调可降低人肺癌细胞株A549/DDP耐药性,可能与下调LC3 Ⅱ、Beclin-1表达,抑制自噬作用有关.
作者:李星;刘东升;杜钢
来源:西部医学 2021 年 33卷 4期