目的:观察反义T-STAR基因对肺腺癌细胞A549的T-STAR蛋白表达的调节作用.方法:实验于2002-09/2004-03在西南医院中心实验室完成.①用双酶切定向克隆法,构建T-STAR反义核酸真核表达载体pneo-STAR.②A549细胞分4组用脂质体介导转染法分别转染:A549-STAR细胞组转入正义T-STAR基因真核表达载体pEGFP-C1/T-STAR,A549-asSTAR细胞组转入反义T-STAR基因真核表达载体pneo-STAR,A549-neo细胞组转入空载体质粒pcl-neo,A549细胞组为相同处理下不加任何载体的A549细胞.③用反转录-聚合酶链反应和western blot联合检测以上各组细胞的TSTAR表达情况.结果:①A549-STAR细胞组的T-STAR蛋白和RNA表达量显著高于A549细胞组[(19 434±219)和(1.280±0.018),(6 922±113)和(0.323±0.015),P<0.05].②A549-asSTAR细胞组的T-STAR蛋白和RNA表达量[(1 122±97),(0.133±0.005)]显著低于A549细胞组(P<0.05).③A549-neo细胞组的T-STAR蛋白和RNA表达量[(6 295±143),(0.625±0.085)]与A549细胞组差异无显著性意义(P>0.05).结论:导入正义T-STAR基因后的A549细胞中,T-STAR蛋白及RNA表达增加,导入反义T-STAR基因后的A549细胞中,T-STAR蛋白及RNA表达减少,说明反义核酸真核表达载体pneo-STAR可以特异性降低A549细胞中T-STAR基因的表达,为
作者:郭莲;彭勇;陈兵
来源:中国临床康复 2006 年 10卷 20期