背景:星形胶质细胞是中枢神经系统中分布最广泛的细胞之一,但其在中枢神经退行性疾病中的作用目前尚未明确.目的:观察脂多糖对星形胶质细胞内钙离子、活性氧、一氧化氮水平和细胞存活率的影响.设计:观察对比实验.单位:苏州大学附属第二医院脑循环研究室.材料:实验于2005-05/2005-08在苏州大学附属第二医院脑循环研究室完成,选择8只新生1～3 d内SD乳鼠,雌雄不限,由苏州大学动物中心提供,[许可证号:SYXK(苏)2002-0037];脂多糖(Sigma公司),MTT和一氧化氮测定试剂盒(碧云天生物技术有限公司).方法:参照Kevin St.McNaught等人的方法体外分离培养新生大鼠皮质星形胶质细胞,经反复传代培养和纯化后,根据加入脂多糖剂量的不同将星形胶质细胞分为5组:空白对照组、脂多糖5 mg/L组、脂多糖10mg/L组、脂多糖20mg/L组和脂多糖40mg/L组,脂多糖对星形胶质细胞的作用时间为30 min和60 min.MTT法测脂多糖作用细胞30 min和60 min细胞存活率;Griess法测量脂多糖作用细胞30 min上清液一氧化氮的含量;采用激光共聚焦显微镜观察不同剂量脂多糖作用细胞30 min对离体大鼠星形胶质细胞内钙离子、作用细胞60 min时活性氧水平的影响,采用相对荧光强度百分比表示星形胶质细胞内钙离子浓度的变化及细胞释放活性氧的水平.主要观察指标:
作者：周媛；李洁；刘春风
来源：中国临床康复 2006 年 10卷 33期
