背景:护骨素是一种由成骨细胞表达的蛋白,可抑制破骨细胞分化和活化.目的:观察比较17β-雌二醇与孕激素对人成骨细胞护骨素基因表达的调控作用.设计:对比观察.单位:中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所.材料:Ⅳ型胶原酶(Sigma公司),胎牛血清(Gibico公司),MEM(Sigma公司),骨钙素放射免疫法测定试剂盒(Dia2Sorin公司).方法:实验于2003-01/2006-03在中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所完成.采用正常人髂前上棘松质骨进行成骨细胞的提取和培养,人成骨细胞用17β-雌二醇与孕酮干预,采用Northern杂交检测护骨素mRNA表达及酶联免疫吸附法检测护骨素蛋白质表达.主要观察指标:①人成骨细胞鉴定.②Northern杂交分析17β-雌二醇、孕酮对人成骨细胞护骨素mRNA表达的影响.③酶联免疫吸附分析17β-雌二醇、孕酮对人成骨细胞护骨素蛋白质分泌的影响.结果:①人成骨细胞鉴定:人成骨细胞分泌的碱性磷酸酶活性为(74.3±4.7)U/g;培养上清液中骨钙素浓度为(3.84±0.39)μg/L.表明分离培养的人成骨细胞具有成骨细胞的特性.②Northern杂交分析17β-雌二醇、孕酮对人成骨细胞护骨素mRNA表达的影响:人成骨细胞对照组护骨素mRNA表达条带弱,与对照组相比,1×10-10,1×10-9,1×10-8 mol/L17β-雌二醇干预组护骨素mRNA表达条带逐渐增
作者：欧阳俊；廖二元；罗湘杭；邵挥戈；周后德
来源：中国组织工程研究与临床康复 2007 年 11卷 10期
