背景:如何抑制或减少神经干细胞凋亡的发生,促进缺氧后神经干细胞的存活,成为脑梗死神经干细胞移植治疗的研究热点.目地:观察在缺氧状态下转染人类persephin基因对神经干细胞凋亡的作用.设计:完全随机分组,对照实验.单位:中山大学附属第二医院神经内科.材料:实验于2006-07/2006-12在中山大学附属第二医院林百欣实验中心完成,重组腺病毒pAd persephin由本实验室构建保存,C17.2神经干细胞由美国哈佛大学医学院Snyder教授惠赠.胰蛋白酶、DMEM/F12购自Gibco公司;胎牛血清来自杭州四季青生物工程公司;多聚赖氨酸购自美国Sigma公司;TUNEL检测试剂盒,阳离子脂质体FuGENE购自瑞士Roche公司;S-P免疫组化试剂盒及DAB显色剂购自福建迈新生物工程公司;鼠抗人Nestin单抗,Persephin兔抗人多抗购自美国Santa Crus公司,persephin反义寡核脱氧苷酸由上海生工合成.方法:①实验干预:将携带人类Persephin基因的重组腺病毒感染C17.2神经干细胞,分为4组,A组:正常对照组,C17.2神经干细胞不作缺氧处理.B组:缺氧处理组,即置于37 ℃、体积分数0.95 N2,体积分数0.05 CO2厌氧培养箱培养.C组:缺氧+pAdpersiphin转染组,即:将携带人类Persephin基因的重组腺病毒感染C17.2神经干细胞,pAdpersiphin转染48 h后的细胞置同B组条件的厌氧培养箱
作者:沈庆煜;肖颂华;黎祥喷;叶剑虹;王艺东
来源:中国组织工程研究与临床康复 2007 年 11卷 24期