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背景:外科长段气管切除后,需要应用气管替代物,理想的替代材料需具有相当的强度、可弯曲性以及内面覆盖的上皮.合适的种子细胞、性质优良的载体、良好的生长媒介是组织工程化气管构建中最重要的组成部分.目的:寻找分离培养肋软骨细胞的最佳方法,构建软骨-支架模型.方法:将取出的兔第5,6肋软骨切成组织片,经胰酶、蛋白酶消化或酶处理后贴壁,分离肋软骨细胞并扩增.传代2次后种植于聚乳酸羟基乙酸或涤纶支架上,继续载体外环境下培养.观察单层培养扩增中软骨细胞的形态、结构,及在支架上培养时的细胞生长状态、外分泌基质.结果与结论:酶消化法和组织块培养法所获细胞均为原代肋软骨细胞,单次传代时间为5 d,但组织块培养法分离细胞较慢,且存在成纤维细胞污染情况,提示酶消化法适合用于肋软骨细胞的分离.肋软骨细胞种植于支架后贴附良好,第2周时可见基质分泌,获得软骨-支架模型,可用于构建组织工程化气管.

作者:刘政呈;郭翔;赵珩

来源:中国组织工程研究与临床康复 2010 年 14卷 34期

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作者:
刘政呈;郭翔;赵珩
来源:
中国组织工程研究与临床康复 2010 年 14卷 34期
标签:
软骨 培养 支架 酶消化法 生物材料 组织块培养法 组织工程
背景:外科长段气管切除后,需要应用气管替代物,理想的替代材料需具有相当的强度、可弯曲性以及内面覆盖的上皮.合适的种子细胞、性质优良的载体、良好的生长媒介是组织工程化气管构建中最重要的组成部分.目的:寻找分离培养肋软骨细胞的最佳方法,构建软骨-支架模型.方法:将取出的兔第5,6肋软骨切成组织片,经胰酶、蛋白酶消化或酶处理后贴壁,分离肋软骨细胞并扩增.传代2次后种植于聚乳酸羟基乙酸或涤纶支架上,继续载体外环境下培养.观察单层培养扩增中软骨细胞的形态、结构,及在支架上培养时的细胞生长状态、外分泌基质.结果与结论:酶消化法和组织块培养法所获细胞均为原代肋软骨细胞,单次传代时间为5 d,但组织块培养法分离细胞较慢,且存在成纤维细胞污染情况,提示酶消化法适合用于肋软骨细胞的分离.肋软骨细胞种植于支架后贴附良好,第2周时可见基质分泌,获得软骨-支架模型,可用于构建组织工程化气管.