背景:获得大量功能良好的肝细胞是生物人工肝的核心.探索出一种可靠的肝细胞低温保存方法进而构建一个肝细胞库是目前生物人工肝研究的热点.目的:比较用UW液在4 ℃条件下保存已经进入Ⅲ期临床试验的C3A细胞与国内构建的永生化肝细胞株L-02细胞的生物学特性.方法:贴壁培养C3A与L-02细胞,胰酶消化,制备成细胞悬液,UW液保存.4 ℃低温保存0,24,48及72 h后,采用流式细胞术分别测定细胞存活率与凋亡率,测定谷草转氨酶与乳酸脱氢酶释放、尿素合成功能及白蛋白分泌功能.结果与结论:随低温保存时间延长,C3A与L-02细胞存活率呈下降的趋势,但C3A细胞的存活率明显高于L-02细胞(P ＜ 0.01);细胞凋亡率呈上升趋势,但48 h后C3A细胞同L-02细胞无差异(P ＞ 0.05).谷草转氨酶及乳酸脱氢酶释放呈现上升的趋势,但C3A细胞明显低于L-02细胞(P ＜ 0.01).白蛋白分泌功能呈下降的趋势,但C3A细胞明显优于L-02细胞(P ＜ 0.01).尿素合成功能呈下降的趋势,但是L-02细胞明显优于C3A细胞(P ＜ 0.01).结果提示,UW液4 ℃保存C3A细胞与L-02细胞时间不易超过48 h.以C3A细胞为材料的人工肝可能更适用于肝功能衰竭合并低白蛋白血症,以L-02细胞为材料的人工肝更适用于肝功能衰竭合并肝性脑病.
作者：李安全；李庆勇；张清华；蒋知新；沙杭；高德禄；高毅
来源：中国组织工程研究与临床康复 2011 年 15卷 3期
