背景:组织工程需要大量的种子细胞,成骨细胞已成为骨组织工程构建的重要种子细胞之一.但成骨细胞取材困难,获得的成骨细胞的纯度不一.目的:建立大鼠新生乳鼠颅骨来源成骨细胞的分离培养纯化方法,观察颅骨来源成骨细胞生物学特点.方法:采用二次酶消化法对SD大鼠乳鼠成骨细胞进行原代培养,扩增.通过差速贴壁法进行成骨细胞纯化.通过形态学、细胞碱性磷酸酶检测、茜素红染色、钙结节Von kossa法染色、超微结构以及细胞增殖曲线,确定其增殖与成骨活性.结果与结论:二次酶消化法培养颅骨来源成骨细胞可获得原代细胞增殖,传代扩增细胞具有典型成骨细胞形态学和生物学活性.碱性磷酸酶、茜素红染色、钙结节Von kossa法染色均呈阳性结果.超微结构显示为高分化功能活跃成骨细胞,细胞增殖曲线显示细胞生长活跃.提示,新生SD大鼠颅骨来源成骨细胞具有良好的增殖与成骨活性,能连续传代增殖,纯度高,细胞生物学特征稳定,适用于做体外实验研究.
作者：李晓峰；赵劲民；苏伟；范锲；罗世兴；马爱国
来源：中国组织工程研究与临床康复 2011 年 15卷 6期
