目的 建立乳鼠成骨细胞体外培养方法,探讨该方法的可行性和应用价值.方法 用出生1～3 d乳鼠颅骨,采用多次胶原酶消化法进行细胞体外培养.倒置显微镜观察细胞形态,对其碱性磷酸酶(ALP)活性及矿化能力进行鉴定,并测定细胞生长曲线.结果 原代培养24 h后,大量细胞贴壁生长,细胞呈圆形,48 h后,贴壁细胞呈长梭形、三角形或不规则多边形,并且贴壁细胞伸出2～3个突起,胞质透亮、饱满,7 d后细胞铺满整个平皿底面.经鉴定,培养细胞具有体内成骨细胞的生物学特性.细胞接种后第1与第2个24 h为细胞的潜伏适应期,第3与第7个24 h生长曲线基本为线性曲线,是细胞的对数生长期.结论 采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞的方法切实可行.
作者：刘岳强；刘开泰；杨晓燕；钟近洁；许永华；张东辉；周婷婷
来源：中国实验动物学报 2007 年 15卷 3期
