背景:雌激素受体β是否参与介导骨髓间充质干细胞的增殖与分化需进一步实验论证.目的:以RNAi技术寻找和验证对大鼠骨髓基质干细胞雌激素受体β基因表达抑制的有效序列.方法:根据GeneBank 数据库提供的SD大鼠雌激素受体β基因核苷酸序列,选择设计能转录小发卡结构RNA (Small hairpin RNAs,shRNA)的DNA 序列.再在两条互补碱基序列的5'端分别加上BamH Ⅰ(GATCC)和Hind Ⅲ (AGCTT)酶的酶切位点,最后形成两条互补的克隆入pSilencer 3.1-H1载体的发夹状siRNA模板序列,进行重组载体的碱基序列测定.结果与结论:重组质粒碱基序列鉴定后,证实真核表达载构建正确.雌激素受体β特异性siRNA真核表达载体构建成功.
作者：郑红；李秀华；殷丽华；李静；丁寅
来源：中国组织工程研究与临床康复 2011 年 15卷 19期
