背景:单核细胞趋化因子(monocyte chemotactic protein,MCP)可促进新生血管的动脉化,形成功能性微动脉,进而实现血管新生.目的:构建Ad-EGFP-MCP-1腺病毒表达载体,包装、纯化并检测病毒滴度,观察其在体表达.方法:PCR法钓取目的基因MCP-1,将其亚克隆入pDC315-EGFP载体,利用辅助包装质粒pBHG lox ΔE1,3 Cre进行病毒包装得到Ad-EGFP-MCP-1,经呼吸道途径转染至肺动脉高压大鼠.结果与结论:通过PCR获得MCP-1全长cDNA,与GenBank比对,序列完全一致.荧光显微镜下可见所包装的Ad-EGFP-MCP-1腺病毒表达载体可在大鼠肺组织中稳定表达,1周时达高峰,持续约4周.证实实验成功构建并包装了Ad-EGFP-MCP-1,其在肺组织中可有效表达.
作者：张芳；王伟；谢悦；张昊
来源：中国组织工程研究与临床康复 2011 年 15卷 50期
