背景：半胱-天冬氨酸蛋白酶8(Caspase-8)是细胞凋亡过程起始的重要因子，二乙酰吗啡可致神经元细胞凋亡，其与二乙酰吗啡致小脑颗粒神经元细胞凋亡之间关系尚未见报道。目的：验证二乙酰吗啡诱导小脑颗粒神经元细胞凋亡与caspase-8基因表达情况，明确caspase-8参与二乙酰吗啡致神经元凋亡过程。方法：取出生7 d SD大鼠小脑颗粒神经元细胞进行体外培养，第7天后，以不同质量浓度的二乙酰吗啡(10，40，80，100，120 mg/L)和C-jun氨基末端激酶通路特异性抑制剂SP600125作用小脑颗粒神经元细胞24 h，并分对照组(0 mg/L二乙酰吗啡)，80 mg/L二乙酰吗啡组，二乙酰吗啡+SP 600125组；采用Hoechst 33258荧光染色观察细胞形态学改变，流式细胞仪测细胞凋亡率，免疫荧光、RT-PCR及Western Blotting检测caspase-8 mRNA和蛋白表达情况。结果与结论：①施加不同质量浓度二乙酰吗啡致神经元细胞凋亡，凋亡细胞出现透亮深蓝色的凋亡小体，细胞核呈现固缩、凝聚及断裂，随给药浓度增加细胞凋亡率呈现升高趋势(P<0.05)。②与对照组相比，在80 mg/L二乙酰吗啡干预时caspase-8 mRNA和蛋白表达明显明显表达(P<0.05)；caspase-8 mRNA随给药浓度增加呈现升高趋势(P<0.05)，二乙酰吗啡+SP600125组中caspase-8 mRNA和蛋白较80 mg/
作者：苏丽萍；刘小山；王雪梅；陈晓；张丽萍；蒲红伟；王治国；王华；李凯超
来源：中国组织工程研究 2015 年 2期
