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背景:表皮干细胞体外培养时易于分化和衰老,增殖能力有限,制约了其在皮肤组织工程的应用和发展,了解表皮干细胞增殖分化的调控机制可以为表皮干细胞的临床应用奠定理论基础。<br>  目的:探索ERK信号通路在人表皮干细胞增殖分化中的作用。<br>  方法:分离培养表皮干细胞,使用ERK通路抑制剂PD98059抑制表皮干细胞ERK通路的活性,转染MEK1重组质粒过表达MEK1或者使用PMA激活ERK通路。通过MTT法检测表皮干细胞的增殖率,克隆形成实验检测表皮干细胞的克隆形成能力,Western blot检测表皮干细胞标志蛋白K19和β1-整合素及分化细胞标志蛋白K10的表达。<br>  结果与结论:①使用PD98059抑制ERK通路后,表皮干细胞增殖率下降,克隆形成减少,细胞分化加强;②过表达MEK1或者使用PMA激活ERK通路后,表皮干细胞增殖率上升,克隆形成能力增强,细胞分化受到抑制;③这些结果表明ERK通路在表皮干细胞的增殖分化中有重要的作用。

作者:李冰;王军爱

来源:中国组织工程研究 2016 年 20卷 45期

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作者:
李冰;王军爱
来源:
中国组织工程研究 2016 年 20卷 45期
标签:
干细胞 分化 表皮干细胞 MAPK ERK 增殖 克隆形成 国家自然科学基金
背景:表皮干细胞体外培养时易于分化和衰老,增殖能力有限,制约了其在皮肤组织工程的应用和发展,了解表皮干细胞增殖分化的调控机制可以为表皮干细胞的临床应用奠定理论基础。<br>  目的:探索ERK信号通路在人表皮干细胞增殖分化中的作用。<br>  方法:分离培养表皮干细胞,使用ERK通路抑制剂PD98059抑制表皮干细胞ERK通路的活性,转染MEK1重组质粒过表达MEK1或者使用PMA激活ERK通路。通过MTT法检测表皮干细胞的增殖率,克隆形成实验检测表皮干细胞的克隆形成能力,Western blot检测表皮干细胞标志蛋白K19和β1-整合素及分化细胞标志蛋白K10的表达。<br>  结果与结论:①使用PD98059抑制ERK通路后,表皮干细胞增殖率下降,克隆形成减少,细胞分化加强;②过表达MEK1或者使用PMA激活ERK通路后,表皮干细胞增殖率上升,克隆形成能力增强,细胞分化受到抑制;③这些结果表明ERK通路在表皮干细胞的增殖分化中有重要的作用。