背景：神经元的体外原代培养在研究神经系统的发育、再生、信号转导机制、神经药理学以及基因表达方面具有极其重要的地位。<br> 目的：建立一种操作更加简单且能够得到较高纯度新生SD大鼠皮质神经元原代培养的方法。<br> 方法：取1 d新生SD大鼠皮质。传统方法实验组：取整个皮质；改良方法实验组：取SD大鼠表面2.0-3.0 mm处皮质。木瓜蛋白酶消化后离心，制备成单细胞悬液，以1×105/孔的浓度接种至含神经元培养液的24孔培养板进行原代培养。培养3 d时采用免疫细胞化学染色方法，使用神经元特异性标志物Tuj1与MAP-2双标记法鉴定所培养的细胞；采用倒置相差显微镜观察6，24，48，72 h及5，7d细胞数和突起长度并记录。<br> 结果与结论：①所培养的细胞可表达神经元特异性标志物Tuj1与MAP-2，因此所培养细胞为神经元，可用于之后实验；②实验组培养至第3天时神经元的纯度已达到峰值92
作者：王东艳；杨金伟；程敬茹；马微；李兴统；郭建辉；李力燕
来源：中国组织工程研究 2016 年 20卷 51期
