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背景:骨组织工程学者们仍在寻找理想的骨组织工程支架,3D打印技术为支架的构建提供了新的方法,同时骨细胞外基质在成骨诱导中的作用也越来越受到关注。目的:采用3D细胞-支架共培养的方式获取聚己内酯-骨细胞外基质复合支架,检测其成骨性能。方法:将216枚3D打印聚己内酯支架分为A组(与96孔板匹配,n=72)、B组(与48孔板匹配,n=144)。①第1轮三维培养:将第5代SD大鼠骨髓间充质干细胞分别接种于两组支架上,接种1,2,3周,A组进行茜素红染色、Masson染色,B组进行胶原、糖胺多糖检测;②第2轮三维培养:将第1轮三维培养1,2,3周的支架进行脱细胞处理,分别记为AE1、AE2、AE3、BE1、BE2、BE3,将第5代SD大鼠骨髓间充质干细胞再次接种于6组支架上,接种1,2,3周,AE1、AE2、AE3组进行茜素红染色,BE1、BE2、BE3组进行钙定量、碱性磷酸酶活性及DNA定量分分析。结果与结论:①Masson染色及糖胺多糖、羟脯氨酸定量分析结果提示,随着培养时间延长,复合支架表面的细胞外基质成分逐渐增加;②碱性磷酸酶活性检测结果提示,聚己内酯-骨细胞外基质复合支架的细胞成骨分化程度显著高于普通聚己内酯支架(P<0.05);③茜素红染色分析及钙定量分析结果提示,复合支架的矿化程度显著高于普通聚己内酯支架(P<0.05

作者:杨鹏;李淳德

来源:中国组织工程研究 2016 年 20卷 52期

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作者:
杨鹏;李淳德
来源:
中国组织工程研究 2016 年 20卷 52期
标签:
生物材料 骨生物材料 聚己内酯 支架 碱性磷酸酶 茜素红 羟脯氨酸 糖胺聚糖
背景:骨组织工程学者们仍在寻找理想的骨组织工程支架,3D打印技术为支架的构建提供了新的方法,同时骨细胞外基质在成骨诱导中的作用也越来越受到关注。目的:采用3D细胞-支架共培养的方式获取聚己内酯-骨细胞外基质复合支架,检测其成骨性能。方法:将216枚3D打印聚己内酯支架分为A组(与96孔板匹配,n=72)、B组(与48孔板匹配,n=144)。①第1轮三维培养:将第5代SD大鼠骨髓间充质干细胞分别接种于两组支架上,接种1,2,3周,A组进行茜素红染色、Masson染色,B组进行胶原、糖胺多糖检测;②第2轮三维培养:将第1轮三维培养1,2,3周的支架进行脱细胞处理,分别记为AE1、AE2、AE3、BE1、BE2、BE3,将第5代SD大鼠骨髓间充质干细胞再次接种于6组支架上,接种1,2,3周,AE1、AE2、AE3组进行茜素红染色,BE1、BE2、BE3组进行钙定量、碱性磷酸酶活性及DNA定量分分析。结果与结论:①Masson染色及糖胺多糖、羟脯氨酸定量分析结果提示,随着培养时间延长,复合支架表面的细胞外基质成分逐渐增加;②碱性磷酸酶活性检测结果提示,聚己内酯-骨细胞外基质复合支架的细胞成骨分化程度显著高于普通聚己内酯支架(P<0.05);③茜素红染色分析及钙定量分析结果提示,复合支架的矿化程度显著高于普通聚己内酯支架(P<0.05