背景:人羊膜上皮细胞具有干细胞的某些性能,可诱导分化为角膜样上皮细胞,但在体外培养时无法示踪,不能有效地监测其细胞转归.目的:探讨利用腺病毒载体将标记基因EGFP转染入人羊膜上皮细胞的可行性及感染效率.方法:pDC316-mCMV-EGFP腺病毒包装后,腺病毒载体携带标记基因EGFP转染体外培养的人羊膜上皮细胞,并扩增培养,观察转染后人羊膜上皮细胞与未转染人羊膜上皮细胞的形态差异,并在荧光显微镜下观察转染基因的表达,用流式细胞仪检测转染细胞的细胞周期及EGFP阳性表达率.结果与结论:①多数转染细胞筛选出的抗性克隆以及培养的克隆细胞与正常体外培养的人羊膜上皮细胞在形态上无显著差异;②瞬时转染后48 h的人羊膜上皮细胞中增强型绿色荧光蛋白阳性表达率最高达99.01
作者:金玲;刘小勇;徐玮;郝晓宁;牛静宜;王乙婷;曹端荣
来源:中国组织工程研究 2017 年 21卷 21期