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背景:骨髓间充质干细胞移植后在宿主恶劣的缺血缺氧微环境中生存率过低,限制了其治疗急性心肌梗死的疗效.目的:探讨人血红素加氧酶1基因修饰的大鼠骨髓间充质干细胞对缺血缺氧环境损伤的耐受能力.方法:人血红素加氧酶1重组腺病毒转染大鼠骨髓间充质干细胞,Western blot法确定人血红素加氧酶1蛋白表达的最佳时间;以缺氧无血清条件模拟体内缺血缺氧微环境培养人血红素加氧酶1基因修饰的大鼠骨髓间充质干细胞,采用CCK-8试剂盒和锥虫蓝染色法检测缺血缺氧培养12,24,48,72 h的细胞存活率,流式细胞术检测缺血缺氧培养24 h的细胞凋亡情况.结果与结论:①在转染后第4天人血红素加氧酶1蛋白表达量最多;②锥虫蓝染色法和CCK-8法检测人血红素加氧酶1组缺血缺氧培养12,24,48,72 h的细胞生存率均高于对照组(P<0.05);③流式细胞术检测人血红素加氧酶1组缺血缺氧培养24 h的生存率高于对照组(P<0.05);④结果表明,人血红素加氧酶1修饰的大鼠骨髓间充质干细胞对缺血缺氧环境损伤的耐受能力明显增强.

作者:邓宁波;韩腾龙;曾元清;蒋知新

来源:中国组织工程研究 2017 年 21卷 29期

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作者:
邓宁波;韩腾龙;曾元清;蒋知新
来源:
中国组织工程研究 2017 年 21卷 29期
标签:
干细胞 骨髓干细胞 血红素加氧酶1 骨髓间充质干细胞 腺病毒 CCK-8 锥虫蓝 流式细胞术 缺血缺氧 凋亡 国家自然科学基金
背景:骨髓间充质干细胞移植后在宿主恶劣的缺血缺氧微环境中生存率过低,限制了其治疗急性心肌梗死的疗效.目的:探讨人血红素加氧酶1基因修饰的大鼠骨髓间充质干细胞对缺血缺氧环境损伤的耐受能力.方法:人血红素加氧酶1重组腺病毒转染大鼠骨髓间充质干细胞,Western blot法确定人血红素加氧酶1蛋白表达的最佳时间;以缺氧无血清条件模拟体内缺血缺氧微环境培养人血红素加氧酶1基因修饰的大鼠骨髓间充质干细胞,采用CCK-8试剂盒和锥虫蓝染色法检测缺血缺氧培养12,24,48,72 h的细胞存活率,流式细胞术检测缺血缺氧培养24 h的细胞凋亡情况.结果与结论:①在转染后第4天人血红素加氧酶1蛋白表达量最多;②锥虫蓝染色法和CCK-8法检测人血红素加氧酶1组缺血缺氧培养12,24,48,72 h的细胞生存率均高于对照组(P<0.05);③流式细胞术检测人血红素加氧酶1组缺血缺氧培养24 h的生存率高于对照组(P<0.05);④结果表明,人血红素加氧酶1修饰的大鼠骨髓间充质干细胞对缺血缺氧环境损伤的耐受能力明显增强.