目的 采用重组报道基因的方法开发一套可筛选环境雌激素和检测青春期前儿童体内雌激素水平的雌激素受体介导的转录激活测评系统.方法 构建含有雌激素受体反应元件的报道载体pGL3-ERE-LUC和pGL3-overERE-LUC以及人类雌激素受体表达载体pSG5-ER.将两种报道载体分别转染入MCF-7细胞中,加入不同浓度雌激素受体配体,观察其对该系统的影响.将两种报道载体分别与雌激素受体表达载体共转染,加入不同浓度雌激素受体配体,观察其对该系统的影响.结果 酶切结果证实pSG5-ER表达载体及报告载体构建成功.转染了pGL3-ERE-LUC或pGL3-overERE-LUC的MCF-7细胞,当加入一定浓度雌二醇(E2)及异黄酮(isoflavone)时,荧光素酶活性均增加;加雌激素受体拮抗剂他莫惜芬(TAM)后,荧光素酶活性下降.结论 将pGL3-ERE-LUC或pGL3-overERE-LUC分别与pSG5-ER共转染入MCF-7细胞,可建立较敏感的环境雌激素测评系统.
作者：冯帼；周问渠；邹冬霆；付欣；陈耀勇
来源：现代临床医学生物工程学杂志 2006 年 12卷 4期
