目的 研究miR-648在胃癌细胞中的表达及对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响,并探讨其分子机制.方法 采用RT-PCR法和Western blot法检测胃癌细胞和正常胃黏膜上皮细胞中miR-648、脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,Syk)mRNA和Syk蛋白的表达情况.采用Lipofectamine 2000转染胃癌细胞干扰miR-648的表达,采用双荧光素酶基因报告实验检测miR-648对Syk的靶向作用.Western blot法检测转染后胃癌细胞中相关蛋白的表达,CCK-8法、流式细胞术和Transwell法检测细胞活性、凋亡、迁移和侵袭.结果 与正常胃黏膜上皮GES-1细胞相比,胃癌SGC-7901、MGC-803细胞中miR-648的表达量显著上调,Syk mRNA和蛋白的表达显著下调.抑制miR-648的表达抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖、侵袭、迁移并促进其细胞的凋亡,且Cyclin D1、Bcl-2、MMP-2蛋白的表达量明显下降,Syk、P21、Bax、E-cadherin蛋白的表达量明显上升.miR-648靶向负向调控Syk的表达.沉默Syk可逆转抑制miR-648对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响.结论 miR-648可通过靶向Syk调控胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭.
作者:何淑兵;左东明;张文山;刘博;智英辉;张国栓
来源:现代消化及介入诊疗 2019 年 24卷 11期