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目的 探讨“10-23”脱氧核酶(“10-23”DZ)抑制突变型p53基因表达的效应.方法 设计合成针对mp53( R273H,CGT> CAT)的“10-23”DZ:p53DZ7、p53DZ9、p53DZ11及硫代修饰物p53DZ 11-s.在无细胞体系观察“10-23”DZ对p53RNA的切割效应.经脂质体将DZ转染进HT29结肠癌细胞株,RT-PCR检测各种DZ对HT29细胞mp53 mRNA的影响;免疫细胞化学及Image Pro Plus 4.5图像分析系统检测mp53蛋白,观察各种DZ及ASO对mp53蛋白表达的影响.结果 p53DZ11和p53DZ11-s在无细胞体系能有效切割mp53 RNA,而对wp53RNA的作用弱.在细胞内p53DZ11-s在浓度为250nM时,能下调HT29细胞mp53 mRNA水平和mp53蛋白表达.结论 针对mp53的273突变点所设计的p53DZ11、p53DZ11-s在细胞外均能有效切割mp53 RNA,在HT29细胞内p53DZ11-s也能抑制mp53mR-NA及mp53蛋白的表达.

作者:方平;蒋利萍;王莉佳

来源:现代预防医学 2012 年 39卷 12期

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作者:
方平;蒋利萍;王莉佳
来源:
现代预防医学 2012 年 39卷 12期
标签:
脱氧核酶 突变型p53 HT29细胞株
目的 探讨“10-23”脱氧核酶(“10-23”DZ)抑制突变型p53基因表达的效应.方法 设计合成针对mp53( R273H,CGT> CAT)的“10-23”DZ:p53DZ7、p53DZ9、p53DZ11及硫代修饰物p53DZ 11-s.在无细胞体系观察“10-23”DZ对p53RNA的切割效应.经脂质体将DZ转染进HT29结肠癌细胞株,RT-PCR检测各种DZ对HT29细胞mp53 mRNA的影响;免疫细胞化学及Image Pro Plus 4.5图像分析系统检测mp53蛋白,观察各种DZ及ASO对mp53蛋白表达的影响.结果 p53DZ11和p53DZ11-s在无细胞体系能有效切割mp53 RNA,而对wp53RNA的作用弱.在细胞内p53DZ11-s在浓度为250nM时,能下调HT29细胞mp53 mRNA水平和mp53蛋白表达.结论 针对mp53的273突变点所设计的p53DZ11、p53DZ11-s在细胞外均能有效切割mp53 RNA,在HT29细胞内p53DZ11-s也能抑制mp53mR-NA及mp53蛋白的表达.