目的 探讨环氧合酶2(COX-2)3'-UTR各调控元件在结肠癌细胞株HT29中的调控作用.方法 以HT29细胞的总RNA为模板,采用RT-PCR法扩增COX-2 3'-UTR全长2217 bp,上下游引物5'端接xba Ⅰ酶切位点.通过PCR制备3'端缺失体方法结合荧光素酶报告基因技术构建含COX-2 3'-UTR不同区域长度的报告质粒(包括3'UTR的全长、前端156 bp区域、前端347 bp区域、前端1006 bp区域、156～347 bp区域、157～2217 bp区域).用瞬时转染的方法将含COX-2 3'-UTR不同区域长度的报告质粒和内参pRL-SV40质粒共转染结肠癌细胞株HT29 24 h,然后分别测定荧光素酶相对活性.数据分析采用t检验.结果 3'-UTR的全长、前端156 bp区域、前端347 bp区域、156～347 bp区域分别可将荧光素酶活性下调70.4
作者：周苏君；张云；朱淼；史俊
来源：中华消化外科杂志 2009 年 8卷 6期
