您的账号已在其他设备登录,您当前账号已强迫下线,
如非您本人操作,建议您在会员中心进行密码修改

确定
收藏 | 浏览126 | 下载0

目的 研究miR-93-5p是否通过靶向Mg+/Mn2+依赖性蛋白磷酸酶1A (PPM1A)基因抑制呼吸道合胞病毒(RSV)感染的支气管上皮细胞凋亡和炎症反应.方法 将人支气管上皮细胞16-HBE分为NC组、RSV组、miR-NC+RSV组、miR-93-5p+ RSV组、si-NC+ RSV组、si-PPM1A+ RSV组、pcDNA-NC+ RSV组、pcDNA-PPM1A+RSV组、miR-93-5p+ pcDNA-NC+ RSV组、miR-93-5p+ pcDNA-PPM1A+ RSV组,利用脂质体Lipofectamine2000进行miR-NC、miR-93-5p、si-NC、si-PPM1A、pcDNA-NC、pcDNA-PPM1A的转染,并以RSV感染细胞.应用实时荧光定量PCR检测miR-93-5p和PPM1A mRNA表达,western blot测定PPM1A、Cleaved-caspase-3蛋白表达,ELISA分析TNF-α、IL-6和IL-1α分泌,流式细胞仪评估细胞凋亡.生物信息学预测与荧光素酶活性检测验证miR-93-5p对PPM1A的靶向调控.结果 与NC组比较,RSV组细胞16-HBE中miR-93-5p表达量减少,PPM1A mRNA和PPM1A蛋白、Cleaved-caspase-3蛋白表达量、TNF-α、IL-6、IL-1α分泌和细胞凋亡率增加.miR-93-5p+ RSV组细胞16-HBE中Cleaved-caspase-3蛋白水平、TNF-α、IL-6、IL-1αα分泌和细胞凋亡率低于miR-NC+ RSV组.miR-93-5p靶向调控PPM1A的表达.与si-NC+ RSV组比较,si-PPM1A+ RSV组细胞16-HBE中Cleaved-caspase-3蛋白水平、TNF-α

作者:陈晔;黄雪;陈伟;李洪波;詹峰

来源:现代预防医学 2021 年 48卷 8期

知识库介绍

临床诊疗知识库该平台旨在解决临床医护人员在学习、工作中对医学信息的需求,方便快速、便捷的获取实用的医学信息,辅助临床决策参考。该库包含疾病、药品、检查、指南规范、病例文献及循证文献等多种丰富权威的临床资源。

详细介绍
热门关注
免责声明:本知识库提供的有关内容等信息仅供学习参考,不代替医生的诊断和医嘱。

收藏
| 浏览:126 | 下载:0
作者:
陈晔;黄雪;陈伟;李洪波;詹峰
来源:
现代预防医学 2021 年 48卷 8期
标签:
miR-93-5p PPM1A 呼吸道合胞病毒 支气管上皮细胞 凋亡 炎症
目的 研究miR-93-5p是否通过靶向Mg+/Mn2+依赖性蛋白磷酸酶1A (PPM1A)基因抑制呼吸道合胞病毒(RSV)感染的支气管上皮细胞凋亡和炎症反应.方法 将人支气管上皮细胞16-HBE分为NC组、RSV组、miR-NC+RSV组、miR-93-5p+ RSV组、si-NC+ RSV组、si-PPM1A+ RSV组、pcDNA-NC+ RSV组、pcDNA-PPM1A+RSV组、miR-93-5p+ pcDNA-NC+ RSV组、miR-93-5p+ pcDNA-PPM1A+ RSV组,利用脂质体Lipofectamine2000进行miR-NC、miR-93-5p、si-NC、si-PPM1A、pcDNA-NC、pcDNA-PPM1A的转染,并以RSV感染细胞.应用实时荧光定量PCR检测miR-93-5p和PPM1A mRNA表达,western blot测定PPM1A、Cleaved-caspase-3蛋白表达,ELISA分析TNF-α、IL-6和IL-1α分泌,流式细胞仪评估细胞凋亡.生物信息学预测与荧光素酶活性检测验证miR-93-5p对PPM1A的靶向调控.结果 与NC组比较,RSV组细胞16-HBE中miR-93-5p表达量减少,PPM1A mRNA和PPM1A蛋白、Cleaved-caspase-3蛋白表达量、TNF-α、IL-6、IL-1α分泌和细胞凋亡率增加.miR-93-5p+ RSV组细胞16-HBE中Cleaved-caspase-3蛋白水平、TNF-α、IL-6、IL-1αα分泌和细胞凋亡率低于miR-NC+ RSV组.miR-93-5p靶向调控PPM1A的表达.与si-NC+ RSV组比较,si-PPM1A+ RSV组细胞16-HBE中Cleaved-caspase-3蛋白水平、TNF-α