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目的:观察5-氮胞苷(5-aza)在体外诱导人骨髓间充质干细胞转化为心肌样细胞的心钠素(ANP)、脑钠素(BNP)、α-骨骼肌动蛋白(α-skeletal actin)、肌球蛋白轻链-2v(MLC-2v)、锌指结构转录因子(GATA-4)和心脏特异同源转录因子(Nkx2.5)基因表达.方法:取非血液疾病的5例胸科手术患者术中已切除掉的肋骨,抽取骨髓.利用淋巴细胞分离液行密度梯度离心法和差异贴壁法进行分离、提纯骨髓问充质干细胞,并进行培养扩增.用流式细胞仪对第2代的骨髓间充质干细胞细胞表面抗原进行测定.应用10 μmol/L 5-aza对第2代的骨髓间充质干细胞诱导24h,于诱导后1,2,3及4周,用反转录.聚合酶链反应检测ANP、BNP、α-skeletal actin、MLC-2v、GATA-4和Nkx2.5基因表达.结果:3份第2代骨髓间充质干细胞样本重复测定,表达CD29,CD44,不表达CD34,CD45.以5-aza诱导培养24 h后,骨髓间充质干细胞形态和排列方式发生明显变化,诱导1周后,细胞体积增大,多呈长梭行,平行排列;诱导2周后,细胞变为短柱状,突起位于2端,相邻细胞的突起紧密接触;诱导3周后,短柱状细胞的突起相互连接,部分细胞可见类肌管样结构;诱导4周后,细胞体积变小,可见由几个细胞连接形成的多核肌管样结构.诱导组细胞ANP、BNP、α-skeletal aetin、MLC-2v、GATA-4和Nkx2.5的聚合酶链反

作者:姜辉;王辉山;汪曾炜;朱洪玉;宋恒昌;张南滨

来源:心肺血管病杂志 2010 年 29卷 1期

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作者:
姜辉;王辉山;汪曾炜;朱洪玉;宋恒昌;张南滨
来源:
心肺血管病杂志 2010 年 29卷 1期
标签:
骨髓,人 间充质干细胞 5-氮胞苷 心肌/细胞学
目的:观察5-氮胞苷(5-aza)在体外诱导人骨髓间充质干细胞转化为心肌样细胞的心钠素(ANP)、脑钠素(BNP)、α-骨骼肌动蛋白(α-skeletal actin)、肌球蛋白轻链-2v(MLC-2v)、锌指结构转录因子(GATA-4)和心脏特异同源转录因子(Nkx2.5)基因表达.方法:取非血液疾病的5例胸科手术患者术中已切除掉的肋骨,抽取骨髓.利用淋巴细胞分离液行密度梯度离心法和差异贴壁法进行分离、提纯骨髓问充质干细胞,并进行培养扩增.用流式细胞仪对第2代的骨髓间充质干细胞细胞表面抗原进行测定.应用10 μmol/L 5-aza对第2代的骨髓间充质干细胞诱导24h,于诱导后1,2,3及4周,用反转录.聚合酶链反应检测ANP、BNP、α-skeletal actin、MLC-2v、GATA-4和Nkx2.5基因表达.结果:3份第2代骨髓间充质干细胞样本重复测定,表达CD29,CD44,不表达CD34,CD45.以5-aza诱导培养24 h后,骨髓间充质干细胞形态和排列方式发生明显变化,诱导1周后,细胞体积增大,多呈长梭行,平行排列;诱导2周后,细胞变为短柱状,突起位于2端,相邻细胞的突起紧密接触;诱导3周后,短柱状细胞的突起相互连接,部分细胞可见类肌管样结构;诱导4周后,细胞体积变小,可见由几个细胞连接形成的多核肌管样结构.诱导组细胞ANP、BNP、α-skeletal aetin、MLC-2v、GATA-4和Nkx2.5的聚合酶链反