目的 探讨黄芪甲苷(AST)与5-氮胞苷(5-aza)联合应用对骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为心肌样细胞的影响.方法 采用贴壁培养法分离大鼠MSCs,流式细胞仪检测MSCs表面抗原CD34和CD44.分组诱导培养4周:Ⅰ组(空白对照组)、Ⅱ组(100 mg/L AST+5 μmol/L 5-aza)、Ⅲ组(10 μmol/L 5-aza)、Ⅳ组(5μmol/L 5-aza).利用免疫荧光法对诱导后细胞进行鉴定,观察心肌特异性结构蛋白cTnT、Desmin的表达,计算诱导分化率.采用逆转录聚合酶链反应( RT-PCR)法检测诱导后MSCs中心钠素(ANP)mRNA的表达水平；以ELISA法检测诱导后细胞内环磷酸腺苷(cAMP)的水平.结果 大鼠MSCs细胞表面抗原CD34阴性,CD44阳性；药物诱导后细胞形态发生显著变化,AST联合5-aza诱导能高效表达心肌特异性蛋白cTnT、Desmin,诱导分化率别为8.33％,18.00％.提高ANP mRNA的表达水平,亦能显著增加诱导后细胞内cAMP的含量.其作用效果与5μmol/L 5-aza诱导组比较,具有显著性差异(P＜0.05或P＜ 0.01),与10 μmol/L 5-aza诱导组作用效果相当(P＞0.05).结论 黄芪甲苷联合5-氮胞苷能在体外成功诱导MSCs分化为心肌样细胞,可使5-aza最佳诱导浓度从10 μmol/L降至5μmol/L,而诱导效果不变.AST联合5-aza诱导后细胞与正常心肌细胞不仅形似,更具备相似的生理功能.

作者：孙敬和；冼绍祥；黄习文；秦佳佳；王陵军；杨忠奇

来源：中药新药与临床药理 2012 年 23卷 4期