目的 构建RhoA-siRNA表达载体,研究其对肝癌HepG2细胞肿瘤生物学行为的影响.方法 利用pGenesil-1 质粒构建RhoA-siRNA表达载体,以脂质体法转染至肝癌HepG2细胞中建立稳定细胞系,并分为3组.转染 pGenesil-1-RhoA-siRNA 载体者为HepG2/RhoA-siRNA组,转染随机对照载体者为HepG2/control组,未转染的肝癌HepG2细胞作为HepG2组.Western blot检测RhoA-siRNA对其蛋白表达的抑制情况.分别采用MTT法、细胞划痕损伤和平板克隆形成实验检测转染细胞的增殖、迁移和生长潜能,流式细胞仪检测细胞周期变化.采用单凶素方差分析、x2检验比较各组差异.结果 3组细胞蛋白表达水平比较,HepG2/RhoA-siRNA组RhoA蛋白的表达明显下调(F=178.19,P<0.05).HepG2/control组和HepG2组细胞划痕损伤在48 h内愈合,而HepG2/RhoA-siRNA组则不能愈合.HepG2/RhoA-siRNA组克隆形成率低于HepG2组和HepG2/control组,分别为39
作者:董伟;窦科峰;杨薛康;张福琴;王德盛
来源:中华消化外科杂志 2010 年 9卷 3期