目的 探讨IL-17对胃癌细胞上皮间质转化(EMT)和侵袭迁移的影响及其可能作用机制.方法 (1)取对数生长期的胃癌细胞株MGC-803,分别运用浓度为0、1 ng/mL、10 ng/mL、100 ng/mL、1 μg/mL IL-17干预48 h,观察细胞形态学变化.取细胞形态变化最为明显的浓度作为后续实验最适浓度.浓度为100 ng/mL的IL-17干预胃癌细胞48h,设为实验组;加入等量PBS干预胃癌细胞48 h,设为对照组.(2) RT-PCR检测两组胃癌细胞中钙粘附蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的RNA表达水平.(3) Western blot检测两组胃癌细胞中E-cadherin和Vimentin的相对蛋白表达量.(4)划痕实验和Transwell实验检测两组胃癌细胞的侵袭和迁移能力.正态分布的计量资料采用-x±s表示,两组比较采用t检验.结果 (1)胃癌细胞EMT形态变化:不同浓度IL-17处理MGC-803胃癌细胞48 h后,细胞形态发生显著改变.主要是细胞由多角紧密连接状态逐渐向连接松散,梭形形态转变,细胞粘附能力明显下降,且随着IL-17浓度从0增加至100 ng/mL时,细胞形态改变逐渐明显;当浓度达到100 ng/mL时,细胞形态改变最明显;但当IL-17浓度继续增加至1μg/mL时,细胞形态改变不再显著,部分细胞出现死亡,漂浮现象.(2) RT-PCR检测结果:实验组和对照组胃癌细胞中E-cadherin mRNA相对表达量分别为0.
作者:李平昂;江宇星;杨世伟;郝迎学;余佩武
来源:中华消化外科杂志 2015 年 14卷 11期