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目的:构建大鼠iNOS基因的siRNA表达体系,为建立RNAi干扰技术平台打下基础.方法:应用siRNA设计软件在大鼠iNOS的mRNA上寻找特异性的短核苷酸序列,设计合成两条互补的小发夹结构的DNA序列,经退火后形成双链DNA片段,将其克隆到线性的pSilencerTM1.0-U6载体中,转化DH5α大肠杆菌,提取质粒,酶切鉴定后进行测序分析.结果:酶切和序列测定结果表明,大鼠iNOS基因的siRNA表达载体构建成功.结论:成功构建了大鼠iNOS基因的siRNA表达体系,为今后借助RNA干扰技术调节iNOS基因的表达、研究iNOS基因与其它因子的关系奠定了基础.

作者:黄静静;库热西·玉努斯;贺捷;陈蓉;哈木拉提·吾甫尔

来源:新疆医科大学学报 2007 年 30卷 9期

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作者:
黄静静;库热西·玉努斯;贺捷;陈蓉;哈木拉提·吾甫尔
来源:
新疆医科大学学报 2007 年 30卷 9期
标签:
RNA干扰 siRNA 诱导型一氧化氮合酶
目的:构建大鼠iNOS基因的siRNA表达体系,为建立RNAi干扰技术平台打下基础.方法:应用siRNA设计软件在大鼠iNOS的mRNA上寻找特异性的短核苷酸序列,设计合成两条互补的小发夹结构的DNA序列,经退火后形成双链DNA片段,将其克隆到线性的pSilencerTM1.0-U6载体中,转化DH5α大肠杆菌,提取质粒,酶切鉴定后进行测序分析.结果:酶切和序列测定结果表明,大鼠iNOS基因的siRNA表达载体构建成功.结论:成功构建了大鼠iNOS基因的siRNA表达体系,为今后借助RNA干扰技术调节iNOS基因的表达、研究iNOS基因与其它因子的关系奠定了基础.