目的：建立一个详细、易于重复的人脐静脉内皮细胞原代培养操作流程。方法采用胶原酶消化法分离人脐静脉内皮细胞；用倒置显微镜观察细胞形态，免疫荧光法检测内皮细胞标志分子，Western blotting检测内皮细胞标志酶———一氧化氮合酶的含量。结果0．2％胶原酶Ⅰ在37℃条件下消化5～13 min可得到高纯度（95％）人脐静脉内皮细胞；在倒置显微镜下，人脐静脉内皮细胞呈典型的鹅卵石样，细胞核明显；Ⅷ因子和CD31的免疫荧光检测呈阳性；Western blotting结果显示，分离到的人脐静脉内皮细胞中有一氧化氮合酶持续合成。结论建立的人脐静脉内皮细胞原代培养和鉴定的操作流程简单易学，且在形态、标志分子和关键性标志酶3个方面提供细胞鉴定的方法和参考数据。
作者：阎江洪；吴倩怡；罗素新；夏勇
来源：新疆医科大学学报 2016 年 39卷 5期
