目的 观察LY294002、雷帕霉素、曲安奈德对体外培养血管瘤内皮细胞中p110、p-Akt、Akt调控的影响,探讨调控PI3K/Akt信号通路在小儿血管瘤的发生、发展及消退过程中的作用.方法 用组织块结合酶消化法培养血管瘤内皮细胞,建立血管瘤血管内皮细胞系,并用第Ⅷ凝血因子相关抗原进行鉴定.待细胞处于对数生长期,换无血清培养液孵育48 h使细胞同步化,然后加入25μmol/L LY294002、10 nmol/L雷帕霉素、1.0 g/L的曲安奈德继续孵育24h,检测血管瘤内皮细胞中p110、p-Akt及Akt的蛋白表达水平,同时检测血管瘤内皮细胞周期分布及细胞凋亡率,分析p110、p-Akt及Akt的表达水平与体外培养血管瘤内皮细胞周期分布及凋亡的相关性.结果 干预24 h后,LY294002组p110和p-Akt的表达水平分别为0.188±0.012和0.091±0.021,雷帕霉素组p110和p-Akt的表达水平分别为0.145±0.007和0.093±0.004,与对照组0.371±0.036和0.224±0.013比较,差异均有统计学意义(P<0.01);曲安奈德组干预24 h后p110蛋白表达水平为0.100±0.004,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01),而p-Akt蛋白则未见表达.细胞周期阻滞于G0/G1期的比例增高:LY294002组为(93.813±2.656)%、雷帕霉素组为(88.307±3.667)%、曲安奈德组为(92.937±0.595)%,与对照组(60.883
作者:李堂江;俞松;罗宇;徐艳朋;彭刚;谢祎;姜福贵
来源:中华小儿外科杂志 2013 年 34卷 9期