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目的 分析InnVit基因的抑制和过表达对永生化黑素细胞株B10BR细胞增殖、周期及凋亡的影响,探讨InnVit基因的生物学功能及其对白癜风中黑素细胞缺失的影响.方法 化学合成InnVit基因特异性siRNA片段以及构建过表达质粒载体P3XF-P120,lipofectamine~(TM) 2000脂质体方法转染BIOBR细胞.半定量RT-PCR法检测InnVit基因mRNA水平;Western印迹检测该蛋白水平变化;MTT法测定细胞增殖情况;流式细胞技术分析细胞周期和凋亡的变化.结果 InnVit基因抑制后mRNA和蛋白表达水平明显低于对照组,InnVit基因过表达质粒组mRNA和蛋白表达水平显著高于对照组;转染后24、48、72 h抑制组的细胞存活量极显著下降(P<0.01),过表达质粒组的细胞存活量在48和72 h极显著增加(P<0.01).转染后48 h基因抑制组的早期凋亡率从(10.24±1.00)

作者:林福全;关翠萍;刘东银;洪为松;周妙妮;许爱娥

来源:中华皮肤科杂志 2010 年 43卷 4期

知识库介绍

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作者:
林福全;关翠萍;刘东银;洪为松;周妙妮;许爱娥
来源:
中华皮肤科杂志 2010 年 43卷 4期
标签:
InnVit基因 白癜风 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期 细胞,培养的 InnVit gene Vitiligo Cell proliferation Apoptosis Cell cycle Cells,cultured
目的 分析InnVit基因的抑制和过表达对永生化黑素细胞株B10BR细胞增殖、周期及凋亡的影响,探讨InnVit基因的生物学功能及其对白癜风中黑素细胞缺失的影响.方法 化学合成InnVit基因特异性siRNA片段以及构建过表达质粒载体P3XF-P120,lipofectamine~(TM) 2000脂质体方法转染BIOBR细胞.半定量RT-PCR法检测InnVit基因mRNA水平;Western印迹检测该蛋白水平变化;MTT法测定细胞增殖情况;流式细胞技术分析细胞周期和凋亡的变化.结果 InnVit基因抑制后mRNA和蛋白表达水平明显低于对照组,InnVit基因过表达质粒组mRNA和蛋白表达水平显著高于对照组;转染后24、48、72 h抑制组的细胞存活量极显著下降(P<0.01),过表达质粒组的细胞存活量在48和72 h极显著增加(P<0.01).转染后48 h基因抑制组的早期凋亡率从(10.24±1.00)