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目的 探讨microRNA-92 (miR-92)对神经母细胞瘤细胞增殖的促进作用,并预测miR-92的靶基因.方法 人工设计合成miR-92的反义寡核苷酸(anti-miR-92寡核苷酸),利用脂质体LipofectamineTM 2000转染神经母细胞瘤SK-N-SH和SK-N-BE2细胞系,利用实时定量PCR检测转染后细胞内miR-92的表达水平,并通过噻唑蓝(MTT)比色法和流式细胞仪检测细胞的增殖和凋亡情况;利用生物信息学方法对miR-92的候选靶基因进行预测.结果 与对照组细胞相比,两种神经母细胞瘤细胞转染anti-miR-92后,miR-92的水平降低约70%,MTT检测细胞的活性降低约20%,流式分析仪检测发现增殖的细胞数降低约50%~60%,而细胞凋亡数增加约2~3倍,差异均具有统计学意义(P<0.05).通过生物信息学和对靶基因潜在功能分析,初步选定BCL2-like 11(BCL2L11)和phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten (PTEN)作为是miR-92的候选靶基因.结论 抑制miR-92的表达导致神经母细胞瘤细胞的增殖降低,凋亡增加,从而可能进一步影响神经母细胞瘤的生长,miR-92可能具有作为临床上神经母细胞瘤治疗分子标记物的潜在功能,为以后更有意义的分子治疗奠定基础.

作者:王光锋;陈鑫;董蒨;张虹;韩芦芦;鹿洪亭;郝希伟

来源:中华小儿外科杂志 2013 年 34卷 11期

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作者:
王光锋;陈鑫;董蒨;张虹;韩芦芦;鹿洪亭;郝希伟
来源:
中华小儿外科杂志 2013 年 34卷 11期
标签:
神经母细胞瘤 微RNAs 细胞增殖 细胞凋亡 Neuroblastoma MicroRNAs Cell proliferation Apoptosis
目的 探讨microRNA-92 (miR-92)对神经母细胞瘤细胞增殖的促进作用,并预测miR-92的靶基因.方法 人工设计合成miR-92的反义寡核苷酸(anti-miR-92寡核苷酸),利用脂质体LipofectamineTM 2000转染神经母细胞瘤SK-N-SH和SK-N-BE2细胞系,利用实时定量PCR检测转染后细胞内miR-92的表达水平,并通过噻唑蓝(MTT)比色法和流式细胞仪检测细胞的增殖和凋亡情况;利用生物信息学方法对miR-92的候选靶基因进行预测.结果 与对照组细胞相比,两种神经母细胞瘤细胞转染anti-miR-92后,miR-92的水平降低约70%,MTT检测细胞的活性降低约20%,流式分析仪检测发现增殖的细胞数降低约50%~60%,而细胞凋亡数增加约2~3倍,差异均具有统计学意义(P<0.05).通过生物信息学和对靶基因潜在功能分析,初步选定BCL2-like 11(BCL2L11)和phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten (PTEN)作为是miR-92的候选靶基因.结论 抑制miR-92的表达导致神经母细胞瘤细胞的增殖降低,凋亡增加,从而可能进一步影响神经母细胞瘤的生长,miR-92可能具有作为临床上神经母细胞瘤治疗分子标记物的潜在功能,为以后更有意义的分子治疗奠定基础.