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目的 探讨OCT4过表达对SH-SY5Y细胞顺铂敏感性的影响及其作用机制.方法 低黏附板无血清培养SH-SY5Y细胞,检测顺铂对SH-SY5Y细胞形成肿瘤球能力的影响,慢病毒转导OCT4建立SH-SY5Y细胞OCT4过表达株,Western blot检测过表达OCT4后ABCG2蛋白水平的变化,MTT法检测SH-SY5Y细胞对顺铂的敏感性,PI染色流式细胞检测细胞凋亡率,罗丹明123检测细胞线粒体膜电位变化.结果 5μmol/L顺铂连续孵育SH-SY5Y细胞4周后,细胞中OCT4mRNA和蛋白含量增高,细胞形成肿瘤球的数目明显提高,过表达OCT4可以在mRNA和蛋白水平明显上调SH-SY5Y中ABCG2的表达,20μmol/L顺铂作用72 h细胞存活率,OCT4组为(69.65±4.20)%,Vector组为(25.75±3.27)%,OCT4过表达株对顺铂耐受能力显著提高(P<0.01).5μmol/L顺铂孵育72 h,OCT4组细胞存活率为(1.5±0.69)%,Vector组为(12.88±4.35)%,OCT4过表达株细胞凋亡率较对照组明显减少(P<0.01).线粒体膜电位较对照组显著增高.结论 过表达OCT4可以显著降低SH-SY5Y细胞对顺铂的敏感性,可能与OCT4上调ABCG2蛋白的表达有关.

作者:汪旭;贾勇圣;孟文静;佟仲生

来源:中华小儿外科杂志 2015 年 36卷 10期

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作者:
汪旭;贾勇圣;孟文静;佟仲生
来源:
中华小儿外科杂志 2015 年 36卷 10期
标签:
神经母细胞瘤 顺铂 慢病毒 Neuroblastoma Cisplatin Slow virus
目的 探讨OCT4过表达对SH-SY5Y细胞顺铂敏感性的影响及其作用机制.方法 低黏附板无血清培养SH-SY5Y细胞,检测顺铂对SH-SY5Y细胞形成肿瘤球能力的影响,慢病毒转导OCT4建立SH-SY5Y细胞OCT4过表达株,Western blot检测过表达OCT4后ABCG2蛋白水平的变化,MTT法检测SH-SY5Y细胞对顺铂的敏感性,PI染色流式细胞检测细胞凋亡率,罗丹明123检测细胞线粒体膜电位变化.结果 5μmol/L顺铂连续孵育SH-SY5Y细胞4周后,细胞中OCT4mRNA和蛋白含量增高,细胞形成肿瘤球的数目明显提高,过表达OCT4可以在mRNA和蛋白水平明显上调SH-SY5Y中ABCG2的表达,20μmol/L顺铂作用72 h细胞存活率,OCT4组为(69.65±4.20)%,Vector组为(25.75±3.27)%,OCT4过表达株对顺铂耐受能力显著提高(P<0.01).5μmol/L顺铂孵育72 h,OCT4组细胞存活率为(1.5±0.69)%,Vector组为(12.88±4.35)%,OCT4过表达株细胞凋亡率较对照组明显减少(P<0.01).线粒体膜电位较对照组显著增高.结论 过表达OCT4可以显著降低SH-SY5Y细胞对顺铂的敏感性,可能与OCT4上调ABCG2蛋白的表达有关.