目的 筛查miR-21抑制表达的人神经母细胞瘤细胞株(SK-N-SH1381) mRNA表达谱,寻找miR-21潜在下游靶基因,以进一步深入探讨miR-21及其参与的通路在肿瘤发生发展中的作用.方法 采用Agilent Human Gene Expression Chip技术筛选了慢病毒转染稳定抑制miR-21表达的入神经母细胞瘤细胞株(SK-N-SH1381)和其配对的慢病毒转染无义序列的入神经母细胞瘤细胞株(SK-N-SH1v3-nc),运用生物信息技术,预测miR-21靶基因、基因功能富集,结合相关文献检索,筛选出候选基因,并在细胞水平通过荧光定量PCR验证芯片结果.结果 基因表达谱芯片共筛选出4 985个差异在2倍以上的mRNA(P<0.05),其中上调表达的基因2 734个,下调表达的基因2 251个.基于microRNA的作用,我们仅选择其中上调的2 734个基因为miR-21可能靶基因,与生物信息学软件分析预测出的398个潜在靶基因进行Venn分析,共获取64个候选潜在靶基因.进一步通过生物信息学分析与文献检索,挑选出6个可能靶基因,分别为EVA1A、TOM1 L2、RGMA、LINC-PINT、NACC2及RPAP3.细胞水平荧光定量PCR结果均与芯片结果一致,EVA1A、TOM1 L2是其中差异表达倍数变化最大的2个候选基因.结论 结合芯片技术和生物信息学分析,在miR-21抑制表达的神经母细胞瘤细胞株中,筛选出6个miR-21可能的下游靶基因,
作者:郑娜;姚伟;王作鹏;郑超;李凯
来源:中华小儿外科杂志 2016 年 37卷 11期